广州微流控芯片数字PCR如何选型

时间:2021年02月01日 来源:

与常规的PCR的方法相比,dPCR有很好的优势。


***定量

常规PCR和实时荧光PCR定量检测都需要已知拷贝数的标准DNA制定标准曲线,由于样品测定在各种条件上不会完全一致,会造成PCR扩增效率的差异,从而影响定量结果的准确性。而ddPCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可以进行***定量。


样品需求量低

在检测珍贵样品和样品核酸存在降解时具有明显的优势。


高灵敏度

ddPCR本质上是将一个传统的PCR反应分成了数万个**的PCR反应,在这些反应中可以精确地检测到很小的目的片段的差异、单拷贝甚至是低浓度混杂样品,且能避免非同源异质双链的形成。


高耐受性

由于目的序列被分配到多个微滴中,***降低了体系间的影响以及背景序列和***物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。 准确的定量结果和优异的重复性。广州微流控芯片数字PCR如何选型

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       数字PCR是一种核酸分子***定量技术。当前核酸分子的定量有三种方法,光度法基于核酸分子的吸光度来定量;,Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数;数字PCR是***的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种***定量的方法。主要采用当前分析化学热门研究领域的微流控或微滴化方法,将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后,有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号,没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积,就可以推算出原始溶液的核酸浓度。广州微滴式数字PCR品牌关于甲基化含量的鉴定。

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**个体化诊疗

通过检测T790M位点突变情况,可以更好地评估一代TKI***的疗效及耐药情况并指导第三代TKI靶向药Osimertinib的使用。然而,由于qPCR平台ARMS检测技术的灵敏度有限,没有办法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效准确的检测到T790M突变。这个时候dPCR技术展现出了****的检测精度,此外,dPCR***定量的优势也能充分发挥出来了,可以监控突变含量变化,做到及早发现耐药。

2.)基因表达分析

伊马替尼(Imatinib)可以有效帮助很多慢性髓细胞白血病(CML)患者延长生存期,但是临床上发现,伊马替尼的疗效与BCR-ABL1融合基因的转录产物表达量有很大的关系。研究人员采用dPCR对CML患者的BCR-ABL1融合基因转录产物进行测定,结果检测下限可以达到0.001%,显示出dPCR在痕量核酸检测方面比qPCR具有无可比拟的优势

MicroDrop-100系统产品特点:

一、适应性广,灵活性高

1、理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用

2、样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定

3、开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。


二、灵敏度高,准确性高

1、***定量——无需依赖标准曲线

2、采用微滴式技术高达100,000个的微滴

3、线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一


三、可分析复杂混合物

1、准确度不完全依赖于扩增效率

2、双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法

3、支持多重数字PCR


四、操作简单,使用方便

1、全封闭防污染设计,一键式自动化操作。

2、可选全中文分析软件 基因表达差异的监测。

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与常规PCR方法相比,数字PCR有如下优势:

       1、能够完全定量:常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线,但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系,条件上会存在差异,另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可进行完全定量。

       2、样本需求量低:适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本

       3、灵敏度高:数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应,这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。

       4、高耐受性:由于目的序列被分配到多个**反应体系中,明显降低了背景信号和yì zhì物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。

采用微滴式技术高达100,000个的微滴。广州微流控芯片数字PCR如何选型

采用主流可靠的解决方案,由微滴生成仪、微滴检测仪、数据分析软件组成。广州微流控芯片数字PCR如何选型

       数字PCR采用的策略概括起来非常简单,就是“分而治之”(divide and conquer)[1],这种做法非常类似于计算机科学中的“分治算法”,将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中,在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA模板) ,实现“单分子模板PCR扩增”,扩增结束后,通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。在实际的数字PCR实验中,事实上是通过呈现两种信号类型的反应器比例和数目进行统计学分析,计算出原始样本中的模板拷贝数。广州微流控芯片数字PCR如何选型

浚和(上海)仪器有限公司是一家供应国内外先进仪器和设备的专业供应商和服务商,致力于为客户提供专业的定制化解决方案。多年来,持续为医药、化工、高校、科研单位、检测院等多个行业提供先进的产品和专业的服务。

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公司主要经营产品包括:等离子清洗机、真空泵、喷雾干燥器、数字PCR、高压灭菌锅、培养箱、切片机、水分测定仪、激光粒度仪、光谱仪、温湿度记录仪等,目前主要合作品牌有:日本雅马拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、广州永诺 、日本KEM等。同时,公司还提供专业的技术服务,如设备的维护、验证等。

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