CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪DNA荧光染料

样品上样到仪器 典型的实验从单细胞悬浮液中的荧光标记细胞开始，但是可以使用任何颗粒类型的样品。将样品置于流式细胞仪上，样品被吸到仪器中，细胞悬浮在一种被称为鞘液的生理缓冲液。流体系统（管道、泵和阀）将初始样品悬浮液排列成单列细胞流，并使细胞通过流式细胞仪以进行分析。流式细胞仪的流体学。流动池（也称为流式小室）使样品中的细胞（颗粒）排成一列。这是单细胞分析的关键步骤。激光检测点 细胞与激光发生相互作用的地方称为激光检测点。您也可能听过它的另一个名字“激光拦截”。这是荧光检测发生的地方。当激光束照射到单个细胞时，一些光会撞到细胞内的物理结构，导致光线散射。这种光散射可被测量，并且与相对细胞大小和细胞内的结构相关。这些测量称为前向角散射（FSC）和侧角散射（SSC），取决于收集光的位置相对于激光路径的角度。几乎同时，来自激光器的光激发与细胞相关的所有荧光团，产生荧光发射。所有这些光被检测器收集并通过流式细胞仪的电子元件进行处理。通过激光检测点之后，流体系统会将不需要的细胞输送到废液桶中。在细胞分选仪中，细胞将在激光检测点被分选和输送到收集管中，以供后续实验使用。CyFlow Analyser倍性分析仪由光源、光学系统、液流系统、计算机、软件组成。CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪DNA荧光染料

样品的新鲜程度直接影响实验的结果。由于次生代谢产物的影响，会导致信号峰过宽，甚至检测不到信号峰的情况。嫩叶的选择要选择新鲜、完全展开、无虫咬、无枯萎、分裂不活跃的部位。嫩叶的检测效果明显好于较老的叶片。倍性检测首先需要裂解液裂解细胞获得游离细胞核，然后用 DAPI 染液将细胞核染色体上的 A-T 碱基染色，再用倍性分析仪仪器检测细胞核里被染色的 A-T 碱基发出的荧光强度。比如二倍体的荧光强度是 100（横坐标），那么四倍体的荧光强度就是 200（横坐标），如下图所示，用 DAPI 染色法检测蚕豆的倍性。结果的纵坐标是细胞数量的显示，通常来说，信号峰高说明信号比较好，杂质少。国产Sysmex倍性分析仪原理利用流式细胞仪快速检测棉花 DNA 倍性，为棉花的倍性鉴定和育种研究提供基础数据。

分选用流式细胞仪还可以分选细胞并回收细胞亚群以用于后续实验。这种专业流式细胞仪又被称为荧光细胞分选仪（FACS），这一术语有时会与“流式细胞仪”混淆。然而，这种用法是错误的。流式细胞仪是不能进行细胞分选的分析仪器。细胞分选仪利用与流式细胞仪相似的流体学和荧光成分，但是能够将异质样品中的特定细胞群体转移到单独试管中，这通常是基于特定的荧光标记特性。如果是在无菌条件下进行收集，则这些细胞可用于进一步的培养、操作和研究。

流式细胞术的潜在应用有非常多，1其中包括检测和测量：1、蛋白质表达 - 遍及所有细胞，包括细胞核内2、蛋白质转译后修饰 - 包括剪切和磷酸化蛋白质3、RNA - 包括IncRNA、 miRNA和mRNA转录物4、细胞健康状态 - 从存活率到晚期凋亡或程序化细胞死亡5、细胞周期状态 - 是评估细胞处于G0/G1期、S期、G2期或多倍体状态的强大工具，包括分析细胞凋亡和活化6、鉴定和表征异质样本中的不同细胞亚群 - 包括区分中枢效应记忆细胞和耗竭T细胞或调节性T细胞。流式细胞仪是对细胞进行自动，高通量分析和分选的装置。

CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析仪实验总结：1、CyFlow Ploidy Analyser Demo 实 验结 果 很 好 ， DAPI 通道 的CV<2%。2. Sysmex-Partec CyStain® UV Precise P试剂盒效果非常好，非常适合对拟南芥、油菜、大蒜、龙葵、糜子、小麦等植物的倍性检测。3. CyFlow Ploidy Analyser配合试剂盒，非常适合植物倍性检测，两分钟内即可出结果，缩短了实验周期。CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析仪专为倍性设计，全球先进原装试剂，2分钟完成倍性检测倍性，检测金标准，海量文献支持。CyFlow Analyser倍性分析仪有365nm的紫外光源/532nm的Nd-YAG绿色激光器。进口国产倍性分析仪

倍性分析仪进行基因组大小需通过DNA嵌入染料进行化学计量染色，该染料应具有较低的DNA峰值变异系数。CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪DNA荧光染料

使用倍性分析仪,对48种培养多年不同基因型的柑橘愈伤组织的细胞DNA含量进行了测定.结果发现,除了路比葡萄柚、尾张和金诺橘等3种愈伤组织变异较小,未出现第二个峰以外,有93.8%的基因型的愈伤组织的细胞均出现了DNA含量加倍的细胞.通过DPAC分析软件分析得知,凤梨甜橙三倍体、宁波金柑、长沙橘、鲁斯脐橙、国庆4号和卡特夏橙等6种愈伤组织的细胞DNA含量还出现了三倍增加及非整倍增加的现象.在待测的48种愈伤组织中,DNA含量变异细胞的百分率较大者为凤梨甜橙三倍体,达18.51%;较小者为暗柳橙,为4.70%.通过邓肯氏新复极差分析得知,不同基因型的DNA含量变异细胞的百分率之间存在差异明显性.在相同继代培养基和相同继代周期的条件下,培养时间对愈伤组织变异大小影响不明显。CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪DNA荧光染料

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