进口双螺旋生物仪器倍性分析仪DNA荧光染料

利用流式细胞仪快速检测棉花 DNA 倍性，为棉花的倍性鉴定和育种研究提供基础数据。以陆地棉珂字棉 312（ Gossypium hirsutumLinn.）的老叶和嫩叶为试材，用 WPB 和 LB01 解离液提取细胞核，经 PI 染色后使用流式细胞仪检测细胞倍性。结果发现，用 WPB 解离液提取棉花嫩叶获得的细胞核用于倍性检测效果更好，表现为主峰离子团清晰而集中、背景碎片少，可以得到明显的主峰、杂峰更少，且收集到的细胞核数目更多。初步建立了利用流式细胞仪快速检测棉花 DNA 倍性的方法。CyFlow倍性分析仪结构紧凑，能够进行动植物和微生物高分辨率DNA分析和基因组大小检测。进口双螺旋生物仪器倍性分析仪DNA荧光染料

样品上样到仪器 典型的实验从单细胞悬浮液中的荧光标记细胞开始，但是可以使用任何颗粒类型的样品。将样品置于流式细胞仪上，样品被吸到仪器中，细胞悬浮在一种被称为鞘液的生理缓冲液。流体系统（管道、泵和阀）将初始样品悬浮液排列成单列细胞流，并使细胞通过流式细胞仪以进行分析。流式细胞仪的流体学。流动池（也称为流式小室）使样品中的细胞（颗粒）排成一列。这是单细胞分析的关键步骤。激光检测点 细胞与激光发生相互作用的地方称为激光检测点。您也可能听过它的另一个名字“激光拦截”。这是荧光检测发生的地方。当激光束照射到单个细胞时，一些光会撞到细胞内的物理结构，导致光线散射。这种光散射可被测量，并且与相对细胞大小和细胞内的结构相关。这些测量称为前向角散射（FSC）和侧角散射（SSC），取决于收集光的位置相对于激光路径的角度。几乎同时，来自激光器的光激发与细胞相关的所有荧光团，产生荧光发射。所有这些光被检测器收集并通过流式细胞仪的电子元件进行处理。通过激光检测点之后，流体系统会将不需要的细胞输送到废液桶中。在细胞分选仪中，细胞将在激光检测点被分选和输送到收集管中，以供后续实验使用。进口双螺旋生物仪器倍性分析仪DNA荧光染料流式倍性分析仪是一种用于生物学、农学、林学领域的分析仪器。

上机（CyFlow Ploidy Analysere倍性分析仪）操作前，样品保存要求：新鲜叶片滤纸打湿后包裹样品保湿，放入自封袋中做好标记，再放入泡沫箱密封。若短期内不能检测。可将叶片使用硅胶干燥法进行保存。每一个测试需求的叶片面积是0.5 cm2，大约小拇指甲盖大小。准备测试的叶片应为次量的 4 倍以上，已备实验重复使用。准备标样，要有已知倍性的标样作为参照，来预测待测样品的倍性，检测结果是一个相对值，并非相对值。特别注意:一定要随样本寄出同物种亲缘较近的已知倍性样本，作为参照，否则样本无法确定倍性。

较简单的流式细胞仪可用于检测细胞特征，包括细胞大小、细胞数量、细胞周期和细胞表型分析等。该技术可为研究人员提供单个细胞的高度特异性信息。从表达绿色荧光蛋白的细胞系到来源于组织的异质细胞群体，都是典型的流式样品类型。实现高效流式细胞分析的关键要求是将样品制备成单细胞悬液，从而确保每个细胞都能进行数据分析。它在20世纪50年代开始被用于检测细胞的体积，可在细胞随快速流动的液流直线通过流动室时进行检测。从那时起，许多工程师和研究人员不断创新，带来了现代流式细胞仪，利用流式细胞仪，溶液中的细胞以每秒10,000个细胞（或更多）的速度通过仪器的激光检测区，进而对细胞进行检测和分析。在分子生物学层次上，利用流式细胞仪测定植物基因组DNA含量，可直接确定再生植株的倍性。

拟南芥是一种生长迅速的小型植物，可进行范围广的核内复制，在不发生有丝分裂的情况下进行基因组扩增。该物种含有有花植物中较小的基因组，约157Mb，C值为0.321pg。这些特征使得拟南芥特别适合作为测定基因组大小的内参，并且可以用于仪器线性度的质量控制。用于流式实验的植物样品通常只需少量植物组织。使用标准手术刀片将植物组织切碎并浸泡于缓冲液中，过滤含植物细胞核的匀浆以去除大的碎片，用DNA特异性荧光染料进行标记，然后在流式细胞仪上采集数据，根据每个细胞核的荧光强度来计算DNA含量。通过与已知标准品比较，可以用荧光强度换算出DNA含量的相对值。拟南芥通常用作内参，只需将内参样品和未知样品的细胞核同时进行分离、染色和分析即可。免疫表型是流式细胞术中较常用的应用。它利用流式细胞术的独特能力来同时分析混合细胞群的多个参数。华南地区CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪应用

CyFlow Analyser倍性分析仪灵活便捷：结构紧凑，便于移动，适用于多种工作场所。进口双螺旋生物仪器倍性分析仪DNA荧光染料

实验仪器：Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析仪（Sysmex Partec）试剂盒：CyStain® UV Precise P（Sysmex Partec）实验步骤：1、取新鲜待测植物叶片 0.5 平方厘米，置于培养皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物叶片周围，用刀片将叶片切碎，以充分提取出完整的细胞核，持续 30-60 秒3. 将培养皿中的液体用 30um 滤网过滤至样品管中4. 向样品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上机（CyFiow Analyser倍性分析仪）检测。进口双螺旋生物仪器倍性分析仪DNA荧光染料

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