华南地区倍性分析仪技术

流式细胞术的特点：1、检测对象：单细胞悬液或生物颗粒；2、检测特点：单细胞水平分析；3、检测参数：多参数荧光信号；4、检测速度：高速，比较高达上万个细胞/秒；5、检测结果：精度高、准确性好；可以对目标细胞进行分选。分析型流式细胞仪：细胞样本分析后再进入废液桶，不能回收利用。分选型流式细胞仪：既能流式分析，还能对分析的目的细胞进行分选。进样管道比较长，还需要保持无菌状态，所以分选型流式细胞仪一般只用于分选。流式细胞术的检测速度：高速，较高达上万个细胞/秒。华南地区倍性分析仪技术

提取高质量的细胞核用于倍性检测至关重要，Peng 等比较了刀切法和研磨法提取棉花细胞核的效果，结果发现，刀切法提取的细胞核质量更高，因此我们选择刀切法来提取棉花细胞核。根据其他植物材料已有的研究报道，植物取材需要考虑样品易获性、细胞核型的稳定性和保存性等因素。如果材料选取不当，会导致提取的细胞核颗粒较少，生成大量的杂质，甚至形成变异系数较大的 DNA 峰。本研究以棉花的老叶和嫩叶为材料制备样品进行对比，结果表明棉花幼嫩叶片检测效果好，完全可以作为倍性鉴定试材。进口配备532nm光源倍性分析仪应用流式细胞仪是用来检测荧光的。可以做定量分析是对荧光显微镜结果的补充。

上机（CyFlow Ploidy Analysere倍性分析仪）操作前，样品保存要求：新鲜叶片滤纸打湿后包裹样品保湿，放入自封袋中做好标记，再放入泡沫箱密封。若短期内不能检测。可将叶片使用硅胶干燥法进行保存。每一个测试需求的叶片面积是0.5 cm2，大约小拇指甲盖大小。准备测试的叶片应为次量的 4 倍以上，已备实验重复使用。准备标样，要有已知倍性的标样作为参照，来预测待测样品的倍性，检测结果是一个相对值，并非相对值。特别注意:一定要随样本寄出同物种亲缘较近的已知倍性样本，作为参照，否则样本无法确定倍性。

拟南芥是一种生长迅速的小型植物，可进行范围广的核内复制，在不发生有丝分裂的情况下进行基因组扩增。该物种含有有花植物中较小的基因组，约157Mb，C值为0.321pg。这些特征使得拟南芥特别适合作为测定基因组大小的内参，并且可以用于仪器线性度的质量控制。用于流式实验的植物样品通常只需少量植物组织。使用标准手术刀片将植物组织切碎并浸泡于缓冲液中，过滤含植物细胞核的匀浆以去除大的碎片，用DNA特异性荧光染料进行标记，然后在流式细胞仪上采集数据，根据每个细胞核的荧光强度来计算DNA含量。通过与已知标准品比较，可以用荧光强度换算出DNA含量的相对值。拟南芥通常用作内参，只需将内参样品和未知样品的细胞核同时进行分离、染色和分析即可。分选用流式细胞仪还可以分选细胞并回收细胞亚群以用于后续实验。

CyFlow Analyser倍性分析仪计算机(内置装有WIN7系统的计算机。外屏可选双画面模式。集成15TFT LED显示屏。4个USB端口。彩色打印机。鼠标和键盘。以太网连接)软件（配备Windows 7操作系统。CyView软件可进行实时数据采集、数据显示和分析。流式细胞仪标准数据格式FCS3。16位分辨率。支持多语言。定位积颗粒计数功能。自动启动和自动存储功能。DNA直方图和双参数点图显示64-4096个频道显示。线性和对数显示。用不同的算法进行手动和自动DNA峰值分析。双粘体辨别技术。直接报告为PDF文件。多管报告。数据以Excel和Power point格式导出。96孔板倍体分析的自动化工作流程。设备要求 电源：100/240VAC，60VA，50/60HZ 操作环境：温度为15至30℃，相对湿度20-85％（非冷凝），仪器置于洁净室中，应避免阳光直射）CyFlow Analyser倍性分析仪应用：植物、动物DNA倍体检测，基因组大小检测，细胞周期检测。深圳Sysmex倍性分析仪原理

流式倍性分析仪是一种用于生物学、农学、林学领域的分析仪器。华南地区倍性分析仪技术

植物染色体倍性鉴定在植物遗传育种中具有十分重要的作用。在育种过程中，通过花药（花粉小孢子）、未受精子房等途径再生出的植株，往往是单倍体、双单倍体及其他倍性植株的混合群体，有效的倍性鉴定是了解其遗传背景和进一步应用的基础。多倍体育种是植物育种的一种途径之一，它不仅可以对性状进行改良，还可以提高植物体内各种有效成分的含量。利用倍性鉴定，准确地辨认多倍体并将其挑选出来，也是多倍体育种中的重要环节一环。另外，倍性鉴定也可用于分析细胞分裂活动等生理和遗传研究。倍性鉴定特别是苗期倍性鉴定，不仅可以减少育种工作量，而且可以减少土地和资金的投入。国内外关于各种鉴定方法报道不少，但较分散。本文综述了各种倍性鉴定方法并对其优缺点进行了评选。不同倍性植株在细胞学和形态解剖学上具有明显差异，目前主要有两大类型直接鉴定法和间接鉴定法。华南地区倍性分析仪技术

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