倍性分析仪系统

时间:2023年07月05日 来源:

细胞核DNA含量和基因组大小对于研究生物的多样性至关重要,尤其是在基础植物学和应用植物学等多个研究领域。这些研究的基础是细胞的内多倍化(即C值)。细胞的内多倍化**了细胞核内DNA含量倍增,指的是同一个体内相邻体细胞具有多种倍性的细胞核现象,由细胞内复制产生。细胞内多倍化在真核生物中普遍存在,尤其在植物中变化范围较大,对研究个体的生长发育具有重要的生物学意义。尽管C值非常重要,但是目前已知C值的植物品种*占所有植物品种的一小部分。基于流式的检测技术简单、快速、准确、可靠,目前该技术已作为测定植物匀浆中C值的优先方法,并且在植物学中的应用越来越范围广。CyFlow Ploidy Analyser配合试剂盒,非常适合植物倍性检测,两 分钟内即可出结果,明显地缩短了实验周期。倍性分析仪系统

上机(CyFlow Ploidy Analysere倍性分析仪)操作前,样品保存要求:新鲜叶片滤纸打湿后包裹样品保湿,放入自封袋中做好标记,再放入泡沫箱密封。若短期内不能检测。可将叶片使用硅胶干燥法进行保存。每一个测试需求的叶片面积是0.5 cm2,大约小拇指甲盖大小。准备测试的叶片应为次量的 4 倍以上,已备实验重复使用。准备标样,要有已知倍性的标样作为参照,来预测待测样品的倍性,检测结果是一个相对值,并非相对值。特别注意:一定要随样本寄出同物种亲缘较近的已知倍性样本,作为参照,否则样本无法确定倍性。深圳CyFlow系列倍性分析仪性能参数CyFlow Analyser倍性分析仪可以高分辨率DNA和基因组大小分析。

拟南芥是一种生长迅速的小型植物,可进行范围广的核内复制,在不发生有丝分裂的情况下进行基因组扩增。该物种含有有花植物中较小的基因组,约157Mb,C值为0.321pg。这些特征使得拟南芥特别适合作为测定基因组大小的内参,并且可以用于仪器线性度的质量控制。用于流式实验的植物样品通常只需少量植物组织。使用标准手术刀片将植物组织切碎并浸泡于缓冲液中,过滤含植物细胞核的匀浆以去除大的碎片,用DNA特异性荧光染料进行标记,然后在流式细胞仪上采集数据,根据每个细胞核的荧光强度来计算DNA含量。通过与已知标准品比较,可以用荧光强度换算出DNA含量的相对值。拟南芥通常用作内参,只需将内参样品和未知样品的细胞核同时进行分离、染色和分析即可。

CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析仪注意事项:1、仪器的外壳不要随意打开;、2实验样品的前处理要和仪器尽量避开,比方液体飞溅损伤仪器;3、上机操作请一定要进行应用培训,或者请参加过培训的老师、同学进行指导,切不可单独上机;、4制作好预约流程,尽量避免一日之内重复开机,并做好实验上机记录,以更好的评估仪器的使用情况;5、如果操作过程中出现堵孔现象,启动清洗功能,并重新用超纯水冲洗2min;6、将仪器的操作手册、光路图及部件做好详细表格标注,放在实验室明显的地方,方便使用者查阅;7、实验数据在进行拷贝时,尽量不要使用自带的优盘,较好外接一个光驱,将数据拷贝在光盘中,如果实验条件有限,应在使用前将优盘进行格式化后方可操作。流式细胞仪具有制样简单用量少、操作高效快速且数据重复性高等优势。

待测细胞被制备成单细胞悬液,经特异性荧光染料染色后置于专门样品管中,在气体压力推动下被压入流动室,流动室内充满鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液),在高压作用下从鞘液管喷出包裹细胞,使细胞排成单列形成细胞液柱,依次通过检测区。液柱与高度聚焦的激光束垂直相交,被荧光染料染色的细胞受到激光激发产生荧光信号和散射光信号,这些光信号通过波长选择的滤光片,由相应的光电管和电子检测器接收并转换成电信号,经放大器放大后送入计算机并进行分析显示和结果输出,测定的结果常用单参数直方图、双参数散点图、轮廓(等高)图和三维立体图来表示。而带有细胞分选功能的流式细胞仪对细胞的分选是由分选器来完成。待分选的细胞在形成液滴时被充以特定的电荷,并通过超高频的压电晶体产生高频振荡,使液柱断裂成均匀的液滴,带有电荷的液滴向下落入偏转板的高压静电场时,按照所带电荷发生偏转,落入指定的收集器内,完成分类收集的目的。CyFlow Analyser倍性分析仪配备365nm光源,高效激发DAPI染料,避免RNA的影响和次生代谢物的影响。深圳CyFlow系列倍性分析仪性能参数

Ploidy Analyser倍性分析仪采用Partec*染色技术。倍性分析仪系统

使用荧光核酸染料标记植物中DNA含量,随后用流式细胞仪高通量进行植物倍性分析,已经成为植物研究中的常用分析手段[1]。相较传统的根尖压片染色体计数,流式细胞法制备样本简单,无需制备中期染色体,通量高,结果准确,并且可以兼容几乎所有植物的任何组织。使用Sysmex-Partec原厂倍性分析试剂和CellTrics过滤器,只需要:1、切碎2、过滤3、上机三步,2分钟内完成倍性分析实验。使用Sysmex-Partec CyFlow PA对植株基因组大小进行预测,染色体倍性进行预测,对突变株进行倍性鉴定,构建植物进化树。倍性分析仪系统

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